Тарчевский, Игорь Анатольевич - Сигнальные системы клеток растений = Plant cell signaling systems. Сигнальные системы защитных реакций растений к патогенам Сигнальные системы клеток растений

Тарчевский И. А. Сигнальные системы клеток растений / отв. ред. А. Н. Гречкин. М. : Наука, 2002. 294 с.

УДК 633.11(581.14:57.04)

ОСОБЕННОСТИ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ РАСТЕНИЙ В АГРОПОПУЛЯЦИИ ПШЕНИЦЫ ПО КЛАССАМ ВАРИАЦИИ ЭЛЕМЕНТОВ ПРОДУКТИВНОСТИ КОЛОСА

А. А. Горюнов, М. В. Ивлева, С. А. Степанов

Условия вегетации существенно сказываются на распределении растений в агропопуляции твердой пшеницы по классам вариации числа колосков, количества зерновок колоса и их массы. Среди сортов саратовской селекции в условиях экстремального по агроклиматическим условиям года характерно разное число растений: стародавним сортам - небольших классов, новым сортам - больших классов вариации. Благоприятные агроклиматические условия повышают число растений, относимых к более высоким классам вариации элементов продуктивности колоса.

Ключевые слова: сорт, колосок, зерновка, пшеница.

FEATURES DISTRIBUTION OF PLANTS IN WHEAT AGROPOPULATION ON CLASSES OF THE VARIATION OF ELEMENTS EFFICIENCY OF THE EAR

A. A. Goryunov, M. V. Ivleva, S. A. Stepanov

Vegetation conditions essentially affect distribution of plants in agropopulation of durum wheat on classes of a variation number of spikelets, quantities kernels an ear and their weight. Among cultivars of the Saratov selection in the conditions of extreme year on agroclimatic conditions it is characteristic various number of plants: to age-old cultivars - the small classes, to new cultivars - the big classes of a variation. Favorable agroclimatic conditions raise number of the plants carried to higher classes of a variation of elements of efficiency of an ear.

Key words: cultivar, spikelet, kernel, wheat.

В морфогенезе пшеницы, по мнению исследователей (Морозова, 1983, 1986), можно выделить несколько фаз: 1) морфогенез апикальной части меристемы зародышевой почки, приводящий к формированию зачаточного главного побега; 2) морфогенез элементов фитомеров зачаточного главного побега в органы растения, определяющий габитус куста. Первая фаза (первичный органогенез - по Ростовцевой,1984) определяет как бы матрицу растения. Как установлено (Ростовцева, 1978; Морозова, 1986; Степанов, Мостовая, 1990; Adams, 1982), особенности прохождения первичных процессов органогенеза отражаются в последующем структурообразовании.

Формирование фитомеров вегетативной зоны зачаточного главного побега является, по мнению исследователей (Морозова, 1986, 1988), процессом видоспецифическим, тогда как развертывание элементов фитоме-ров зачаточного главного побега в функционирующие органы растений - процесс сортоспецифический. Процесс формирования фитомеров генеративной зоны побега - более сортоспецифический (Морозова, 1994).

Наиболее контрастно выражена значимость первичных морфоге-нетических процессов, т.е. заложение и формирование фитомеров вегетативной и генеративной зон побега пшеницы и их последующая реализация в соответствующих агроклиматических условиях при анализе структуры урожая по вариационным кривым элементов продуктивности побегов (Морозова,1983, 1986; Степанов, 2009). Этому предшествует выборочный учёт распределения растений в их агропопуляции по классам вариации отдельных элементов продуктивности, в частности количеству колосков, числу зерновок в колосе, массе зерновок колоса.

Материал и методика

Исследования проводились в 2007-2009 гг. В качестве объектов изучения были выбраны следующие сорта яровой твёрдой пшеницы саратовской селекции: Гордеиформе 432, Мелянопус 26, Мелянопус 69, Саратовская 40, Саратовская 59, Саратовская золотистая, Людмила, Валентина, Ник, Елизаветинская, Золотая волна, Аннушка, Крассар. Основные наблюдения и учеты проводились в полевых мелкоделяночных опытах на полях пристанционного селекционного севооборота НИИСХ Юго-Востока и Ботанического сада СГУ, повторность опытов 3-кратная. Для проведения структурного анализа продуктивности сортов пшеницы брали в конце вегетации по 25 растений из каждой повторности, которые затем объединяли в группу и методом случайной выборки отбирали из неё для анализа 25 растений. Учитывались число колосков, число зерен в колосках, масса одного зерна. На основании полученных данных опре-

деляли в соответствии с методикой З. А. Морозовой (1983) особенности распределения растений в агропопуляции твёрдой пшеницы по классам вариации элементов продуктивности колоса. Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием пакета программы Excel Windows 2007.

Результаты и их обсуждение

Как показали наши исследования, в условиях вегетации 2007 г. основное число главных побегов пшеницы сортов саратовской селекции по количеству колосков колоса находилось во 2- и 3-м классах вариации. Лишь незначительное число растений были отнесены к 1-му классу - 4% (табл. 1).

Таблица 1. Число побегов пшеницы сортов саратовской селекции по классам вариации количества колосков колоса, % (2007 г.)

Сорт Класс вариации

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й

Гордеиформе 432 0 92 8 0 0

Мелянопус 26 4 76 20 0 0

Мелянопус 69 4 64 32 0 0

Саратовская 40 7 93 0 0 0

Стародавние 4 81 15 0 0

Саратовская 59 4 76 20 0 0

Саратовская золотистая 0 16 80 4 0

Людмила 8 44 48 0 0

Валентина 0 16 76 8 0

Ник 14 14 72 0 0

Елизаветинская 0 24 72 4 0

Золотая волна 8 16 52 24 0

Аннушка 0 20 64 16 0

Крассар 0 20 48 32 0

Новые 4 27 59 10 0

При анализе сортов по группам было установлено, что для стародавних сортов характерно большее число растений 2-го класса вариации (81%) и меньшее число растений 3-го класса вариации (15%). По группе новых сортов выявлено, что большее число растений относятся к 3-му классу вариации (59%), некоторая часть растений 4-го класса вариации (10%). Установлено, что у некоторых новых сортов число растений 4-го класса вариации больше 10% - Крассар (32%), Золотая волна (24%), Аннушка (16%), а у отдельных сортов их число меньше 10% (Валентина,

Саратовская золотистая, Елизаветинская) или не наблюдается вовсе - Саратовская 59, Людмила, Ник (см. табл. 1).

В условиях вегетации 2008 г., который отличался более благоприятным агроклиматическим состоянием, среди сортов саратовской селекции, как стародавних, так и новых, большее число растений по количеству колосков колоса были отнесены к 3-му классу вариации. Ни одного растения, как и в предшествующий год, не было представлено в 5-м классе вариации. Характерно, что, в отличие от новых сортов твердой пшеницы, большее число растений 2-го класса вариации отмечено у стародавних сортов - 41% (табл. 2).

Таблица 2. Число побегов пшеницы сортов саратовской селекции по классам вариации количества колосков колоса, % (2008 г.)

Сорт Класс вариации

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й

Гордеиформе 432 12 20 60 8 0

Мелянопус 26 4 36 56 4 0

Мелянопус 69 4 48 48 0 0

Саратовская 40 4 60 28 8 0

Стародавние 6 41 48 5 0

Саратовская 59 28 48 24 0 0

Саратовская золотистая 0 28 64 8 0

Людмила 8 44 48 0 0

Валентина 4 28 64 4 0

Ник 4 28 68 0 0

Елизаветинская 8 36 52 4 0

Золотая волна 4 12 68 16 0

Аннушка 0 28 60 12 0

Крассар 8 28 32 32 0

Новые 7 32 52,5 8,5 0

Среди новых сортов твердой пшеницы выделялись сорта, для которых, как и в предыдущий год, характерно наличие части растений в 4-м классе вариации по количеству колосков колоса - Крассар (32%), Золотая волна (16%), Аннушка (12%), Саратовская золотистая (8%), Валентина (4%), Елизаветинская (4%), т. е. наблюдалась та же тенденция, что и в предыдущий, 2007 г. (см. табл. 2).

В условиях вегетации 2009 г. большая часть растений пшеницы сортов саратовской селекции по количеству колосков колоса была отнесена к 4-му и 3-му классам вариации: новые сорта - 45 и 43% соответственно, стародавние сорта - 30 и 51% соответственно. Характерно, что некото-

рым сортам свойственно наличие большего относительно среднего значения числа растений 4-го класса вариации - Аннушка (76%), Валентина (64%), Ник (56%), Золотая волна (52%), Саратовская 40 (48%). У некоторых сортов отмечены растения 5-го класса вариации - Золотая волна (12%), Крассар (8%), Людмила (8%), Гордеиформе 432 и Саратовская 40 - 4% (табл. 3).

Таблица 3. Число побегов пшеницы сортов саратовской селекции по классам вариации количества колосков колоса, % (2009 г.)

Сорт Класс вариации

Гордеиформе 432 4 12 52 28 4

Мелянопус 26 4 36 44 16 0

Мелянопус 69 0 8 64 28 0

Саратовская 40 0 4 44 48 4

Стародавние 2 15 51 30 2

Саратовская 59 0 28 48 24 0

Саратовская золотистая 4 8 72 16 0

Людмила 0 4 56 32 8

Валентина 0 0 36 64 0

Ник 4 4 36 56 0

Елизаветинская 4 12 40 44 0

Золотая волна 0 4 32 52 12

Аннушка 0 0 24 76 0

Крассар 0 8 40 44 8

Новые 1 8 43 45 3

Таким образом, проведенные исследования показали, что условия вегетации существенно сказываются на распределении растений в агро-популяции по классам вариации количества колосков колоса. Среди сортов саратовской селекции в условиях экстремального по агроклиматическим условиям года характерно большее число растений: стародавним сортам - 2-го класса, новым сортам - 3-го класса, а некоторым из них 4-го класса вариации. При благоприятных агроклиматических условиях повышается число растений, относимых к более высоким классам вариации по числу колосков колоса твердой пшеницы.

В условиях вегетации 2007 г. число главных побегов пшеницы сортов саратовской селекции по количеству зерновок колоса находилось во 1-м и 2-м классах вариации. Лишь часть растений некоторых сортов были отнесены к 3-, 4-и 5-му классам (табл. 4).

Сорт Класс вариации

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й

Гордеиформе 432 96 4 0 0 0

Мелянопус 26 96 4 0 0 0

Мелянопус 69 92 8 0 0 0

Саратовская 40 93 7 0 0 0

Стародавние 94 6 0 0 0

Саратовская 59 80 20 0 0 0

Саратовская золотистая 20 48 32 0 0

Людмила 0 64 24 12 0

Валентина 48 36 16 0 0

Ник 28 62 10 0 0

Елизаветинская 48 48 4 0 0

Золотая волна 12 32 48 4 4

Аннушка 52 36 12 0 0

Крассар 88 8 4 0 0

Новые 42 39 17 1,5 0,5

При анализе сортов по группам было установлено, что для стародавних сортов характерно большее число растений 1-го класса вариации (94%) и очень незначительная доля растений 2-го класса вариации (6%). По группе новых сортов выявлено, что большее число растений отдельных сортов также относятся к 1-му классу вариации - Крассар (88%), Саратовская 59 (80%), Аннушка (52%), Валентина (48%), Елизаветинская (48%), отдельных сортов - ко 2-му классу вариации - Людмила (64%), Ник (62%), Саратовская золотистая (48%), Елизаветинская (48%) или же к 3-му классу - Золотая волна - 48% (см. табл. 3). У двух сортов отмечены растения 4-го класса вариации по количеству зерновок колоса - Людмила (12%) и Золотая волна - 4% (см. табл. 4).

В период вегетации 2008 г., который, как уже отмечалось ранее, отличался более благоприятными агроклиматическими условиями, среди сортов саратовской селекции, как стародавних, так и новых, большее число растений по количеству колосков колоса было отнесено ко 2- и 3-му классам вариации. Однако среди стародавних сортов два сорта отличались большим относительно средних значений числом растений 2-го класса - Саратовская 40 и Мелянопус 69 - соответственно 72 и 48%. Среди новых сортов 3 сорта также отличались большим относительно средних значений числом растений 2-го класса - Саратовская 59 и Валентина (72%), Людмила - 64%.

В отличие от предыдущего года среди сортов саратовской селекции характерно наличие некоторого числа растений, отнесенных к 4-му классу вариации по количеству зерновок колоса. Особенно это свойственно сортам Мелянопус 26, Елизаветинская, Людмила, Гордеиформе 432, Мелянопус 69, Ник, Аннушка (табл. 5).

Таблица 5. Число побегов пшеницы сортов саратовской селекции по классам вариации количества зерновок колоса, % (2008 г.)

Сорт Класс вариации

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й

Гордеиформе 432 0 28 56 8 8

Мелянопус 26 0 24 48 24 4

Мелянопус 69 4 48 40 8 0

Саратовская 40 0 72 24 4 0

Стародавние 1 43 42 11 3

Саратовская 59 20 72 8 0 0

Саратовская золотистая 4 36 56 4 0

Людмила 0 64 24 12 0

Валентина 0 72 28 0 0

Ник 0 32 60 8 0

Елизаветинская 0 48 32 20 0

Золотая волна 12 32 48 4 4

Аннушка 4 44 40 8 4

Крассар 4 40 52 4 0

Новые 5 49 39 6 1

В условиях вегетации 2009 г. распределение растений пшеницы сортов саратовской селекции по количеству колосков колоса было различным в зависимости от групповой принадлежности - стародавние или новые сорта. По группе стародавних сортов большая часть растений были отнесены к 3- и 4-му классам вариации - 42,5% и 27% соответственно. У двух сорта, Мелянопус 26 и Мелянопус 69, наблюдались растения 5-го класса вариации по количеству зерновок колоса (табл. 6).

Среди новых сортов большая часть растений была отнесена к 3- и 2-му классам - 50,5 и 24% соответственно (табл. 6) . Характерно, что некоторым сортам свойственно наличие большего относительно среднего значения числа растений соответствующего класса: 2-го класса вариации - Саратовская 59 (56%), Елизаветинская (32%), Крассар (32%), Гордеиформе 32 (28%), Саратовская золотистая (28%); 3-го класса вариации - Валентина (72%), Аннушка (60%), Крассар (56%), Саратовская 40 (52%), Ник (52%), Елизаветинская (52%); 4-го класса вариации - Зо-

лотая волна (36%), Аннушка (32%), Саратовская золотистая и Людмила (20%). Примечательно, что в отличие от предыдущих лет в условиях 2009 г. часть растений половины сортов находилась в 5-м классе вариации по количеству зерновок колоса - Людмила, Ник, Золотая волна, Аннушка, Мелянопус 26 и Мелянопус 69 (см. табл. 6).

Таблица 6. Число побегов пшеницы сортов саратовской селекции по классам вариации количества зерновок колоса, % (2009 г.)

Сорт Класс вариации

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й

Гордеиформе 432 12 28 28 32 0

Мелянопус 26 8 22 46 20 4

Мелянопус 69 12 8 44 32 4

Саратовская 40 4 20 52 24 0

Стародавние 9 19,5 42,5 27 2

Саратовская 59 12 56 24 8 0

Саратовская золотистая 4 28 48 20 0

Людмила 0 12 52 20 16

Валентина 4 20 72 4 0

Ник 8 24 52 8 8

Елизаветинская 4 32 52 12 0

Золотая волна 4 12 40 36 8

Аннушка 4 0 60 32 4

Крассар 12 32 56 0 0

Новые 6 24 50,5 15,5 4

Проведенные исследования показали, что условия вегетации существенно сказываются на распределении растений в агропопуляции по классам вариации количества зерновок колоса. Среди сортов саратовской селекции в условиях экстремального по агроклиматическим условиям года характерно большее число растений: стародавним сортам - 1-го класса, новым сортам -1-, 2- и 3-го классов, а некоторым из них 4-го класса вариации. При благоприятных агроклиматических условиях повышается число растений, относимых к более высоким классам вариации по числу зерновок колоса твердой пшеницы.

В условиях вегетации 2007 г. число главных побегов пшеницы сортов саратовской селекции по массе зерновок колоса находилось в 1- и 2-м классах вариации (табл. 7).

При анализе сортов по группам было установлено, что для некоторых стародавних сортов число растений 1-го класса вариации составляло

100% - Гордеиформе 432 и Мелянопус 26,93% - Саратовская 40. Существенно отличался в этом плане стародавний сорт Мелянопус 69, для которого характерно большее число растений 2-го класса - 80%. По группе новых сортов выявлено, что некоторым сортам свойственно большее относительно среднего значения число растений соответствующего класса: 1-го класса - Золотая волна (96%), Саратовская 59 (80%), Крассар (76%), Аннушка (68%); 2-го класса - Ник (52%), Людмила (48%), Саратовская золотистая (44%), Валентина и Елизаветинская (40%); 3-го класса вариации - Людмила (28%), Саратовская золотистая (24%), Ник (14%), Валентина - 12%. Примечательно, что у двух сортов, Людмила и Валентина, наблюдались растения 5-го класса вариации по массе зерновок колоса -соответственно 12 и 4% (см. табл. 7).

Таблица 7. Число побегов пшеницы сортов саратовской селекции по классам вариации массы зерновок, % (2007 г.)

Сорт Класс вариации

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й

Гордеиформе 432 100 0 0 0 0

Мелянопус 26 100 0 0 0 0

Мелянопус 69 4 80 16 0 0

Саратовская 40 93 7 0 0 0

Стародавние 74 22 4 0 0

Саратовская 59 80 16 4 0 0

Саратовская золотистая 32 44 24 0 0

Людмила 12 48 28 12 0

Валентина 44 40 12 4 0

Ник 28 52 14 6 0

Елизаветинская 56 40 4 0 0

Золотая волна 96 4 0 0 0

Аннушка 68 32 0 0 0

Крассар 76 20 4 0 0

Новые 55 33 9,5 2,5 0

В условиях вегетации 2008 г. наблюдалось разное число растений соответствующего класса вариации по массе зерновок колоса. Среди стародавних сортов саратовской селекции большее число растений по этому элементу продуктивности соответствовало 2-му классу вариации - 48%, среди новых сортов - 3- и 2-му классам вариации - соответственно 38 и 36%. Некоторое число растений соответствующих сортов распределено в 4- и 5-м классах вариации (табл. 8).

Сорт Класс вариации

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й

Гордеиформе 432 12 48 32 4 4

Мелянопус 26 0 32 44 12 12

Мелянопус 69 16 60 20 4 0

Саратовская 40 24 52 12 8 4

Стародавние 13 48 27 7 5

Саратовская 59 48 48 4 0 0

Саратовская золотистая 4 24 64 4 4

Людмила 12 48 28 12 0

Валентина 4 36 56 0 4

Ник 12 44 32 12 0

Елизаветинская 8 36 36 20 0

Золотая волна 8 28 40 20 4

Аннушка 8 36 36 16 4

Крассар 4 28 48 20 0

Новые 12 36 38 12 2

Некоторые саратовские сорта отличались большим относительно среднего значения представительством растений соответствующего класса вариации по массе зерновок колоса: 1-го класса - Саратовская 59 (48%), Саратовская 40 (24%), Мелянопус 69 (16%); 2-го класса - Мелянопус 69 (60%), Саратовская 40 (52%), Саратовская 59 и Людмила (48% соответственно), Ник (44%); 3-го класса - Саратовская золотистая (64%), Валентина (56%), Крассар (48%), Мелянопус 26 (44%); 4-го класса - Елизаветинская, Золотая волна и Крассар (20% соответственно); 5-го класса вариации - Мелянопус 26 - 12% (см. табл. 8).

В условиях вегетации 2009 г. большая часть растений пшеницы сортов саратовской селекции по массе зерновок колоса была отнесена к 3- и 4-му классам вариации. Причём средние значения классов вариации группы стародавних сортов и группы новых сортов существенно различались. В частности, стародавние сорта отличались большим представительством растений 3- и 4-го классов вариации - 41,5 и 29,5% соответственно, новые сорта отличались преимущественным присутствием в агропопуляции растений 4- и 3-го классов вариации - 44 и 26% соответственно. Обращает на себя внимание значительное число растений 5-го класса вариации по массе зерновок колоса, что особенно свойственно сортам Крассар (32%), Валентина (24%), Золотая волна (20%), Саратовская 40-16% (табл. 9).

Сорт Класс вариации

1-й 2-й 3-й 4-й 5-й

Гордеиформе 432 4 16 48 32 0

Мелянопус 26 4 28 38 18 12

Мелянопус 69 0 8 48 40 4

Саратовская 40 4 20 32 28 16

Стародавние 3 18 41,5 29,5 8

Саратовская 59 14 36 38 8 4

Саратовская золотистая 4 8 28 52 8

Людмила 0 0 12 80 8

Валентина 0 8 28 40 24

Ник 8 20 28 36 8

Елизаветинская 0 20 24 44 12

Золотая волна 0 16 32 32 20

Аннушка 4 8 32 56 0

Крассар 0 8 12 48 32

Новые 3 14 26 44 13

Так же как и в другие годы, некоторые сорта отличались большим относительно среднего значения представительством растений соответствующего класса вариации по массе зерновок колоса: 1-го класса - Саратовская 59 (14%); 2-го класса - Саратовская 59 (36%), Мелянопус 26 (28%), Саратовская 40, Ник и Елизаветинская (соответственно 20%); 3-го класса вариации - Гордеиформе 432 и Мелянопус 69 (48% соответственно), Саратовская 59 (38%), Золотая волна и Аннушка (32% соответственно); 4-го класса вариации - Людмила (80%), Аннушка (56%), Саратовская золотистая (52%), Крассар (48%), Мелянопус 69-40% (см. табл. 9).

Таким образом, проведенные исследования показали, что на распределение растений в агропопуляции по классам вариации массы зерновок колоса существенно влияют условия вегетации. Для большинства стародавних сортов в экстремальных условиях вегетации число растений 1-го класса составляет 93-100%, тогда как новые сорта выгодно отличаются существенным представительством растений 2- и 3-го классов. В благоприятных условиях вегетации доля растений более высокого класса вариации увеличивается, но для новых сортов сохраняется та же тенденция - большее число растений более высоких классов вариации по массе зерновок колоса по сравнению со стародавними сортами.

Морозова З. А. Морфогенетический анализ в селекции пшеницы. М. : МГУ, 1983. 77 с.

Морозова З. А. Основные закономерности морфогенеза пшеницы и их значение для селекции. М. : МГУ, 1986. 164 с.

Морозова З. А. Морфогенетический аспект проблемы продуктивности пшеницы // Морфогенез и продуктивность растений. М. : МГУ, 1994. С. 33-55.

Ростовцева З. П. Влияние фотопериодической реакции растения на функцию верхушечной меристемы в вегетативном и генеративном органогенезе // Свет и морфогенез растений. М., 1978. С. 85-113.

Ростовцева З. П. Рост и дифференцировка органов растения. М. : МГУ 1984. 152 с.

Степанов С. А., Мостовая Л. А. Оценка продуктивности сорта по первичному органогенезу побега пшеницы // Продукционный процесс, его моделирование и полевой контроль. Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 1990. С. 151-155.

Степанов С. А. Морфогенетические особенности реализации продукционного процесса у яровой пшеницы // Изв. СГУ Сер., Химия, биология, экология. 2009. Т. 9, вып.1. С. 50-54.

Adams M. Plant development and crop productivity // CRS Handbook Agr. Productivity. 1982. Vol.1. P. 151-183.

УДК 633.11: 581.19

Ю. В. Даштоян, С. А. Степанов, М. Ю. Касаткин

Саратовский государственный университет им. Н. Г. Чернышевского 410012, г. Саратов, ул. Астраханская, 83 e-mail: [email protected]

Установлены особенности в содержании пигментов различных групп (хлорофиллов а и b, каротиноидов), как и соотношения между ними в листьях пшеницы, принадлежащих разным фитомерам побега. Минимальное или максимальное содержание хлорофиллов и каротиноидов может наблюдаться в различных листьях, что зависит от условий вегетации растений.

Ключевые слова: фитомер, хлорофилл, каротиноид, лист, пшеница.

STRUCTURE AND THE MAINTENANCE OF PIGMENTS OF PHOTOSYNTHESIS IN THE PLATE OF LEAVES OF WHEAT

Y. V. Dashtojan, S. A. Stepanov, M. Y. Kasatkin

Features in the maintenance of pigments of various groups (chlorophyll а and chlorophyll b, carotenoids), as well as parities between them in the leaves of wheat

Действие элиситорных препаратов обусловлено наличием в их составе особых биологически активных веществ. По современным представлениям сигнальные вещества или элиситоры - это биологически активные соединения различной природы, которые в очень низких дозировках, измеряемых мили-, микро-, а в отдельных случаях - и нанограммами, вызывают каскады различных ответных реакции растений на генетическом, биохимическом и физиологическом уровнях. Воздействие их на фитопатогенные организмы осуществляется посредством влияния на генетический аппарат клеток и изменения физиологии самого растения, придания ему большей жизнестойкости, сопротивляемости различным негативным факторам среды.

Взаимоотношение растений с окружающим миром, как высокоорганизованных элементов экологических систем, осуществляется путем восприятия физических и химических сигналов, поступающих извне и корректирующих все процессы их жизнедеятельности посредством влияния на генетические структуры, иммунную и гормональную системы. Исследование сигнальных систем растений - это одно из самых многообещающих направлений в современной клеточной и молекулярной биологии. В последние десятилетия учеными достаточно много внимания уделялось изучению сигнальных систем, отвечающих за устойчивость растений к фитопатогенам .

Биохимические процессы, происходящие в клетках растений, строго скоординированы целостностью организма, которая дополняется их адекватными реакциями на потоки информации, связанные с различными воздействиями биогенных и техногенных факторов. Эта координация осуществляется за счет работы сигнальных цепей (систем), которые сплетаются в сигнальные сети клеток. Сигнальные молекулы включают в работу большинство гормонов, как правило, не проникая внутрь клетки, а взаимодействуя с молекулами-рецепторами внешних клеточных мембран. Эти молекулы представляют собой интегральные мембранные белки, полипептидная цепь которых пронизывает толщу мембраны. Разнообразные молекулы, инициирующие трансмембранную передачу сигналов, активируют рецепторы в нано-концентрациях (10-9-10-7 М). Активированный рецептор передает сигнал внутриклеточным мишеням - белкам, ферментам. При этом модулируется их каталитическая активность или проводимость ионных каналов. В ответ на это формируется определенный клеточный ответ, который, как правило, заключается в каскаде последовательных биохимических реакций. Помимо белковых посредников в передаче сигналов могут участвовать и относительно небольшие молекулы-мессенджеры, функционально являющиеся посредниками между рецепторами и клеточным ответом. Примером внутриклеточного мессенджера является салициловая кислота, участвующая в индукции стрессовых и иммунных реакций растений. После выключения сигнальной системы мессенджеры быстро расщепляются или (в случае катионов Са) откачиваются через ионные каналы. Таким образом, белки образуют своеобразную «молекулярную машину», которая, с одной стороны, воспринимает внешний сигнал, с другой, - обладает ферментной или иной активностью, моделируемой этим сигналом .

В многоклеточных растительных организмах передача сигнала осуществляется через уровень общения клеток. Клетки «разговаривают» на языке химических сигналов, что позволяет осуществлять гомеостаз растения как целостной биологической системы. Геном и сигнальные системы клеток образуют сложную самоорганизующуюся систему или своеобразный «биокомпьютер». Жестким носителем информации в нем является геном, а сигнальные системы играют роль молекулярного процессора, выполняющего функции оперативного управления. В настоящее время мы располагаем только самыми общими сведениями о принципах работы данного чрезвычайно сложного биологического образования. Во многом остаются еще невыясненными молекулярные механизмы сигнальных систем. Среди решения многих вопросов предстоит расшифровка механизмов, обусловливающих временный (преходящий) характер включения тех или иных сигнальных систем, и в то же время, длительную память об их включении, проявляющуюся, в частности, в приобретении системного пролонгированного иммунитета .

Между сигнальными системами и геномом существует двусторонняя связь: с одной стороны, ферменты и белки сигнальных систем закодированы в геноме, с другой - сигнальные системы управляются геномом, экспрессируя одни и супрессируя другие гены. Этот механизм включает рецепцию, преобразование, умножение и передачу сигнала на промоторные участки генов, программирование экспрессии генов, изменение спектра синтезируемых белков и функциональный ответ клетки, например, индукцию иммунитета к фитопатогенам .

В качестве сигнальных молекул или элиситоров, проявляющих индукционную активность, могут выступать различные органические соединения-лиганды и их комплексы: аминокислоты, олигосахариды, полиамины, фенолы, карбоновые кислоты и эфиры высших жирных кислот (арахидоновая, эйкозапентаеновая, олеиновая, жасмоновая и др.), гетероциклические и элементоорганические соединения, в том числе некоторые пестициды и др. .

К вторичным элиситорам, образующимся в клетках растений при действии биогенных и абиогенных стрессоров и включающимся в сигнальные сети клеток, относят фитогормоны: этилен, абсцизовую, жасмоновую, салициловую кислоты, а

также полипептид системин и некоторые другие соединения, которые вызываютэкспрессию защитных генов, синтез соответствующих белков, образование фитоалексинов (специфические вещества, обладающие антимикробным действием и вызывающие гибель патогенных организмов и пораженных клеток растений) и, в конечном итоге, способствуют формированию системной устойчивости у растений к негативным факторам среды .

В настоящее время наиболее изучены семь сигнальных систем клеток: циклоаденилатная, MAP-киназная (mitogen-activated protein-kinase), фосфатидокислотная, кальциевая, липоксигеназная, НАДФН-оксидазная (супероксидсинтазная), NO-синтазная. Ученые продолжают открывать новые сигнальные системы и их биохимических участников .

Растения в ответ на атаку патогенов могут использовать различные пути формирования системной устойчивости, которые запускаются разными сигнальными молекулами. Каждый из элиситоров, воздействуя на жизнедеятельность растительной клетки по определенному сигнальному пути, через генетический аппарат, вызывает широкий комплекс реакций, как защитного (иммунного), так и гормонального характера, приводящих к изменению свойств самих растений, что позволяет им противостоять целому комплексу стрессовых факторов. При этом в растениях осуществляется ингибирующее или синергирующее взаимодействие различных сигнальных путей, сплетающихся в сигнальные сети .

Индуцированная устойчивость по проявлению сходна с генетически обусловленной горизонтальной устойчивостью, с той лишь разницей, что характер ее определяется фенотипическими изменениями генома. Тем не менее, она обладает определенной стабильностью и служит примером фенотипической иммунокоррекции растительной ткани, поскольку в результате обработки веществами элиситорного действия изменяется не геном растений, а лишь его функционирование, связанное с уровнем активности защитных генов .

Определенным образом эффекты, возникающие при обработке растений иммуноиндукторами, родственны генной модификации, отличаясь от нее отсутствием количественных и качественных изменений самого генофонда. При искусственной индукции иммунных реакций наблюдаются только фенотипические проявления, характеризующиеся изменениями активности экспрессированных генов и характера их функционирования . Тем не менее, вызванные обработкой фитоактиваторами растений изменения обладают определенной степенью стойкости, что проявляется в индукции пролонгированного системного иммунитета, поддерживающегося в течение 2-3 и более месяцев, а также в сохранении приобретенных свойств растениями в течение 1-2 последующих репродукций .

Характер действия определенного элиситора и достигаемые эффекты находятся в самой тесной зависимости от силы формируемого сигнала или используемой дозировки. Данные зависимости, как правило, имеют не прямолинейный, а синусоидальный характер, что может служить доказательством переключения сигнальных путей при их ингибирующих или синергирующих взаимодействиях .Установлено также, что в условиях действия стрессовых факторов растения положительно реагируют на более низкие дозировки фитоактиваторов, что свидетельствует о более высокой выраженности их адаптогенного действия. Напротив, обработка данными веществами в больших дозировках, как правило, вызывала десенсибилизационные процессы в растениях, резко снижая иммунный статус растений и приводя к усилению восприимчивости растений к заболеваниям .

Президиум Российской академии наук
ПРИСУДИЛ
премию имени А.Н.Баха 2002 года
академику Игорю Анатольевичу ТАРЧЕВСКОМУ
за цикл работ «Сигнальные системы клеток растений»

Академик И.А. ТАРЧЕВСКИЙ
(Казанский Институт биохимии и биофизики КНЦ РАН, Институт биохимии им.А.Н.Баха РАН)

СИГНАЛЬНЫЕ СИСТЕМЫ КЛЕТОК РАСТЕНИЙ

И.А.Тарчевский в течение почти 40 лет исследует влияние абиотических и биотических стрессоров на метаболизм растений. Последние 12 лет наибольшее внимание уделяется одному из наиболее перспективных направлений современной биохимии и физиологии растений — роли сигнальных систем клеток в формировании состояния стресса. По этой проблеме И.А.Тарчевским было опубликовано 3 монографии: «Катаболизм и стресс у растений» , «Метаболизм растений при стрессе» , и «Сигнальные системы клеток растений» . В 30 статьях И.А.Тарчевским и соавторами опубликованы результаты исследований аденилатциклазной , кальциевой , липоксигеназной и НАДФН- оксидазной сигнальных систем клеток растений. Исследуется NО-синтазная сигнальная система .

Анализ особенностей катаболизма растений при стрессе позволил сделать вывод о сигнальной функции «обломков кораблекрушения» — олигомерных продуктов деградации биополимеров и «фрагментов» фосфолипидов . Сделанное в этой работе предположение об элиситорных (сигнальных) свойствах продуктов деградации кутина позднее было подтверждено зарубежными авторами .

Публиковались не только работы экспериментального характера, но и обзоры, в которых подводились итоги исследований сигнальных систем клеток растений отечественными и зарубежными авторами .

Начатые в лаборатории автора А.Н.Гречкиным и затем продолженные им в самостоятельной лаборатории исследования липидного метаболизма позволили получить результаты приоритетного характера, значительно расширившие представления о липоксигеназном сигнальном каскаде. Изучение влияния интермедиата НАДФН-оксидазной системы — салициловой кислоты на синтез белков привело к выводу о причине давно установленной биологической активности другого соединения — янтарной кислоты. Оказалось, что последняя является миметиком салицилата и обработка ею растений «включает» сигнальные системы, что приводит к синтезу салицилат-индуцируемых защитных белков и повышению устойчивости к патогенам .

Было обнаружено, что различные экзогенные стрессовые фитогормоны — жасмоновая, салициловая и абсцизовая кислоты вызывают индукцию синтеза как одних и тех же белков (что свидетельствует о «включении» этими гормонами одних и тех же сигнальных путей), так и специфичных для каждого из них белков (что указывает на одновременное «включение» и различающихся сигнальных каскадов) .
Впервые в мировой литературе И.А.Тарчевским был проведен анализ функционирования в растениях всех известных сигнальных систем клеток и возможностей их взаимовлияния, что привело к представлению о существовании в клетках не изолированных сигнальных систем, а о сигнальной сети, состоящей из взаимодействующих систем .

Была предложена классификация патоген-индуцируемых белков по функциональному признаку и сделан обзор особенностей синтеза «включаемого» различными сигнальными системами синтеза этих белков . Одни из них являются участниками сигнальных систем растений, и их интенсивное образование обеспечивает усиление восприятия, преобразования и передачи в генетический аппарат элиситорных сигналов, другие ограничивают питание патогенов, третьи катализируют образование фитоалексинов, четвертые — реакции укрепления клеточных стенок растений, пятые вызывают апоптоз инфицированных клеток. Функционирование всех этих патоген-индуцированных белков существенно ограничивает распространение инфекции по растению. Шестая группа белков может непосредственно действовать на структуру и функции патогенов, прекращая или подавляя их развитие. Некоторые из этих белков вызывают деградацию клеточной стенки грибов и бактерий, другие дезорганизуют функционирование их клеточной мембраны, изменяя ее проницаемость для ионов, третьи подавляют работу белок-синтезирующей машины, блокируя синтез белков на рибосомах грибов и бактерий или действуя на вирусную РНК.

Наконец, впервые был подведен итог работам по конструированию устойчивых к патогенам трансгенных растений, причем в основу этой обзорной работы была положена упомянутая выше классификация патоген-индуцируемых защитных белков , Особое внимание уделено результатам исследования с помощью трансгенных растений особенностей функционирования сигнальных систем клеток.

Исследования сигнальных систем клеток растений имеет не только большую теоретическую важность (так как они составляют основу молекулярных механизмов стресса), но и большое практическое значение, поскольку позволяют создавать эффективные антипатогенные препараты на основе природных элиситоров и интермедиатов сигнальных систем.

Различным аспектам функционирования сигнальных систем клеток растений были посвящены Тимирязевская, Костычевская и Сисакяновская лекции И.А.Тарчевского (последняя в соавторстве с А.Н.Гречкиным), а также выступления на Международных конференциях (в Венгрии, Англии, Франции, Польше, Турции, Израиле, Индии, Германии и др.).

За исследования одной из сигнальных систем — липоксигеназной, И.А.Тарчевский и чл.-корр.РАН А.Н.Гречкин в 1999 году были удостоены премии имени В.А.Энгельгардта Академии наук Республики Татарстан.

Во многих публикациях И. А.Тарчевского принимали участие в качестве соавторов его коллеги — член-корреспондент РАН А.Н.Гречкин, доктора биологических наук Ф.Г.Каримова, Н.Н.Максютова, В.М.Чернов, О.А.Чернова и кандидат биологических наук В.Г.Яковлева.

В 2001 году по инициативе И.А.Тарчевского и при его участии в качестве председателя Оргкомитета в Москве был проведен Международный симпозиум по сигнальным системам клеток растений.

ЛИТЕРАТУРА

1. Тарчевский И.А. Катаболизм и стресс у растений. Наука. М. 1993. 83 c.
2. Тарчевский И.А. Метаболизм растений при стрессе. Избранные труды. Изд.»Фэн» (Наука). Казань. 2001. 448 с.
3. Тарчевский И.А.Сигнальные системы клеток растений. М.: Наука, 2002. 16,5 п.л. (в печати).
4. Максютова Н.Н., Викторова Л.В., Тарчевский И.А. Действие АТФ и ц-АМФ на синтез белков зерновок пшеницы. // Физиол. биохим. культур. растений. 1989. Т. 21. № 6. С.582-586.
5. Grechkin A.N., Gafarova T.E., Korolev O.S., Kuramshin R.A., Tarchevsky I.A. The monooxygenase pathway of linoleic acid oxidation in pea seedlings. / In: «Biological Role of Plant Lipids». Budapest: Akad. Kiado. New York, London. Plenum. 1989. P.83-85.
6. Tarchevsky I.A., Grechkin A.N. Perspectives of search for eicosаnoid analogs in plants. / In: «Biological Role of Plant Lipids». Budapest: Akad. Kiado. New York, London. Plenum. 1989. P.45-49.
7. Гречкин А.Н., Кухтина Н.В., Курамшин Р.А., Сафонова Е.Ю., Ефремов Ю.Я., Тарчевский И.А. Метаболизация коронаровой и верноловой кислот в гомогенате эпикотилей гороха. // Биоорган. химия. 1990. Т.16. N 3. С. 413-418.
8. Grechkin A.N., Gafarova T.E., Tarchevsky I.A. Biosynthesis of 13-oxo-9(Z), 11(E)-tridecadienoic acid in pea leaf homogenate. / In: «Plant Lipid Biochemistry. Structure and Utilization». London. Portland Press. 1990. P. 304-306.
9. Grechkin A.N., Kuramshin R.A., Tarchevsky I.A. Minor isomer of 12-oxo-10,15-phytodienoic acid and the mechanism of natural cyclopentenones formation. / In: «Plant Lipid Biochemistry. Structure and Utilization». London. Portland Press. 1990. P.301-303.
10. Tarchevsky I.A., Kuramshin R.A., Grechkin A.N. Conversation of α-linolenate into conjugated trienes and oxotrienes by potato tuber lipoxygenase. / In: «Plant Lipid Biochemistry. Structure and Utilization». London. Portland Press. 1990. P. 298-300.
11. Гречкин А.Н., Курамшин Р.А., Тарчевский И.А. Образование нового α-кетола гидропероксид-дегидразой из семян льна. // Биоорган. химия. 1991. Т. 17. № 7. С. 997-998.
12. Grechkin A.N., Kuramshin R.A, Safonova E.Y., Yefremov Y.J., Latypov S.K., Ilyasov A.V., Tarchevsky I.A. Double hydroperoxidation of linolenic acid by potato tuber lipoxygenase. // Biochim. Biophys. Acta. 1991. V. 1081. N 1. P. 79-84.
13. Тарчевский И.А. Регуляторная роль деградации биополимеров и липидов. // Физиол. растений. 1992. Т. 39. N 6. С.156-164.
14. Тарчевский И.А., Максютова Н.Н., Яковлева В.Г. Влияние салициловой кислоты на синтез белков проростков гороха. // Физиология растений. 1996. Т.43. N 5. С. 667-670.
15. Тарчевский И.А., Максютова Н.Н., Яковлева В.Г., Чернов В.М. Микоплазма-индуцированные и жасмонат-индуцированные белки растений гороха. // Доклады РАН. 1996. Т. 350. N 4. С. 544 — 545.
16. Чернов В.М., Чернова О.А.,Тарчевский И.А. Феноменология микоплаз-менных инфекций у растений. // Физиол. растений. 1996. Т. 43. N.5. С. 721 — 728.
17. Тарчевский И.А. О вероятных причинах активирующего действия янтарной кислоты на растения./ В кн.»Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве». Пущино. 1997. С.217-219.
18. Гречкин А.Н., Тарчевский И.А. Липоксигеназная сигнальная система. // Физиол. растений. 1999. Т. 46. № 1. С. 132-142.
19. Каримова Ф.Г., Корчуганова Е.Е., Тарчевский И.А., Абубакирова М. Р. Na+/Ca+ -обмен в клетках растений. // Доклады РАН. 1999. Т.366. № 6. С. 843-845.
20. Каримова Ф.Г., Тарчевский И.А., Мурсалимова Н.У., Гречкин А.Н. Влияние продукта липоксигеназного метаболизма -12-гидроксидодеценовой кислоты на фосфорилирование белков растений. // Физиол. растений. 1999. Т.46. №1. С.148-152.
21. Тарчевский И.А. Взаимодействие сигнальных систем клеток растений, «включаемых» олигосахаридами и другими элиситорами. // «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». Материалы Пятой конференции. М. Изд-во ВНИРО. 1999. С.105-107.
22. Тарчевский И.А., Гречкин А.Н., Каримова Ф.Г., Корчуганова Е.Е., Максютова Н.Н., Мухтарова Л.Ш., Яковлева В.Г., Фазлиев Ф.Н., Ягушева М.Р., Палих Э., Хохлова Л.П. О возможности участия циклоаденилатной и липоксигеназной сигнальных систем в адаптации растений пшеницы к низким температурам. / В кн. «Грани сотрудничества. К 10-летию Соглашения о сотрудничестве между Казанским и Гиссенским университетами». Казань: УНИПРЕСС, 1999. С.299-309.
23. Тарчевский И.А, Максютова Н.Н., Яковлева В.Г., Гречкин А.Н. Янтарная кислота — миметик салициловой кислоты. // Физиол. растений. 1999. Т. 46. № 1. С. 23-28.
24. Гречкин А.Н., Тарчевский И.А. Липоксигеназный сигнальный каскад растений. // Научный Татарстан. 2000. № 2. С. 28-31.
25. Гречкин А.Н., Тарчевский И.А. Сигнальные системы клеток и геном. // Биоорганическая химия. 2000. Т. 26. № 10. С. 779-781.
26. Тарчевский И.А. Элиситор-индуцируемые сигнальные системы и их взаимодействие. // Физиол. растений. 2000. Т.47.№ 2. С.321-331.
27. Тарчевский И.А., Чернов В.М. Молекулярные аспекты фитоиммунитета. // Микология и фитопатология. 2000. Т. 34. № 3. С. 1-10.
28. Karimova F., Kortchouganova E., Tarchevsky I., Lagoucheva M. The oppositely directed Ca+2 and Na+ transmembrane transport in algal cells. // Protoplasma. 2000. V. 213. P. 93-98.
29. Tarchevsky I.A., Karimova F.G., Grechkin A.N. and Moukhametchina N.M. Influence of (9Z)-12-hydroxy-9-dodecenoic acid and methyl jasmonate on plant protein phosphorylation. // Biochemical Society Transactions. 2000. V. 28. N. 6. P. 872-873.
30. Тарчевский И.А. Патоген-индуцируемые белки растений. // Прикладная микробиология и биохимия. 2001. Т. 37. № 5. С. 1-15.
31. Тарчевский И.А., Максютова Н.Н., Яковлева В.Г. Влияние салицилата, жасмоната и АБК на синтез белков. // Биохимия. 2001. Т. 66. N. 1. С. 87-91.
32. Yakovleva V.G., Tarchevsky I.A., Maksyutova N.N. Influence of NO donor nitroprusside on protein synthesis in pea seedlings. // Abstracts of International Symposium «Plant Under Environmental Stress». Moscow. Publishing House of Peoples’ Friendship University of Russia. 2001. P. 318-319.
33. Yakovleva V.G., Maksyutova N.N., Tarchevsky I.A., Abdullaeva A.R. Influence of donor and inhibitor of NO-synthase on protein synthesis of pea seedlings. // Abstracts of International Symposium «Signalling systems of plant cells». Moscow, Russia, 2001, June, 5-7. ONTI, Pushchino. 2001. P. 59.

АВ11 и АВ12 играют ключевую роль в АБК-индуциро-

ванном сигнальном пути . Наблюдались рН-зависимая и М§2+ -зависимая акти-

вация ABU .

У протеинфосфатаз МР2С основной мишенью является МАРККК, активируемая при воздействии различных стрессоров. Такая специфика становится объяснимой, если учесть, что у некоторых протеинфосфатаз обнаружены места связывания с соответствующими им протеинкиназами

Участниками сигналь-

ных систем клеток. Это позволяет обеспечивать существование комплекса протеинкиназа-протеинфосфатаза и своевременно и эффективно блокировать преобразование и передачу в геном сигнального импульса. Принцип работы этого механизма достаточно прост: накопление определенной протеинкиназы - интермедиата сигнальной цепи - активирует фосфопротеин-фосфатазу и приводит к дефосфорилированию (инактивации) протеинкиназы. Например, активация некоторых протеинкиназ может привести к фосфорилированию и активации соответствующих протеинфосфатаз. При исследовании функционирования протеинфосфатаз часто используют специфические ингибиторы, например окадаевую кислоту и каликулин .

ФАКТОРЫ РЕГУЛЯЦИИ ТРАНСКРИПЦИИ

Синтез матричных РНК катализируется ДНК-зависи- мыми РНК-полимеразами"- одними из наиболее крупных белковых комплексов, состоящих из двух больших и 5- 13 малых субъединиц, что определяется сложностью и важностью их фу нкций. Эти субъединицы имеют консервативные последовательности аминокислот, в большей или меньшей степени общие для животных и растений, iАктивность РНК-полимеразы и узнавание транскрибируемых генов регулируются с помощью нескольких типов белков. Наибольшее внимание привлекают факторы регуляции транскрипции." Эти белки способны взаимодействовать с другими белками, в том числе с идентичными, изменять конформацию при фосфорилировании нескольких входящих в их состав аминокислот,[узнавать регуляторные последовательности нуклеотидов в промоторных участках генов, что приводит к изменению интенсивности их экспрессии.: Именно факторы регуляции транскрипции направляют РНК-полимеразу на точку инициации транскрипции соответствующего гена (или совокупности генов), не участвуя непосредственно в каталитическом акте син - теза мРНК.

У животных организмов определены особенности структуры более 1 тысячи факторов регуляции транс - крипции. Клонирование их генов способствовало получению информации, позволившей осуществить классификацию этих белков.

Все факторы регуляции транскрипции содержат три основных домена. Наиболее консервативным является ДНКсвязывающий домен. Последовательность аминокислот в нем определяет узнавание определенных последовательностей нуклеотидов в промоторах генов.

В зависимости от гомологии первичной и вторичной структур ДНК-связывающего домена факторы регуляции транскрипции подразделяются на четыре суперкласса: 1) с доменами, обогащенными основными аминокислотами; 2) с ДНК-связывающими доменами, координирующими ионы цинка, - "цинковыми пальцами"; 3) с доменами типа спи- раль-поворот-спираль; 4) с доменами типа |3-скэффолд, образующими контакты с малой бороздкой ДНК [Патрушев, 2000]. Каждый суперкласс подразделяется на классы, семейства и подсемейства. В суперклассе 1 обращают на себя внимание факторы регуляции транскрипции с доменами типа "лейциновая застежка-молния", представляющими собой ос-спирали, у которых каждая седьмая аминокислота является лейцином, выступающим с одной стороны спирали. Гидрофобное взаимодействие остатков лейцина одной молекулы с аналогичной спиралью другой молекулы обеспечивает димеризацию (по аналогии с застежкоймолнией) факторов регуляции транскрипции, необходимую для взаимодействия с ДНК.

В суперклассе 2 "цинковые пальцы" представляют собой последовательности аминокислот, содержащие четыре остатка цистеина, которые оказывают координирующее действие на ион цинка. "Цинковые пальцы" взаимодействуют с большой бороздкой ДНК. В другом классе этого суперкласса структура "цинковых пальцев" обеспечивается двумя остатками цистеина и двумя остатками гистидина (рис. 5), еще в одном классе координация двух ионов цинка в одном "пальце" осуществляется шестью остатками цистеина. Вершины "цинковых пальцев" контактируют с большой бороздкой ДНК.

Исследование структуры факторов регуляции транскрипции у растений позволило установить гомологию с белками этого типа, характерными для животных объектов. Типичные факторы регуляции транскрипции содержат следующие три основных структурных элемента: ДНК-связы- вающий, олигомеризационный и регуляторный домены . Мономерные формы транскрипционных факторов неактивны, в отличие от димерных (олигомерных). Образованию олигомерных форм предшествует фосфорилирование мономерных форм в цитозоле, затем происходит их ассоциация и после этого доставка в ядро или с помощью

Рис. 5. Структура "цинкового пальца" фактора регуляции транскрипции

Г - остаток гистидина; Ц-S - остаток цистеина

специальных транспортных белков или благодаря взаимодействию с рецепторными белками в порах ядерной мембраны, после чего они переносятся в ядро и взаимодействуют с промоторными участками

соответствующих генов. "Факторы регуляции транскрипции кодируются мультигенными семействами, и их синтез может индуцироваться патогенами и элиситорами, а активность изменяться в результате посттрансляционной модификации (главным образом, фосфо-рилирования или дефосфорилирования).

В настоящее время создана все более расширяющаяся база данных о структуре различных факторов регуляции транскрипции и их генов у растений . Показано, что специфичность связывания с ДНК определяется аминокислотными последовательностями стержневой и петлевой зон в уже упоминавшихся лейциновых "застежкахмолниях", представляющих собой одну из наиболее многочисленных и консервативных групп эукариотиче-ских факторов регуляции транскрипции . Часто факторы регуляции транскрипции классифицируются именно по структуре ДНК-связывающих доменов, которые могут включать спиральные последовательности аминокислот, "цинковые пальцы" - участки с двумя цистеино-выми и двумя гистидиновыми остатками или со многими ци-стеиновыми остатками и т.д. У растений от одного до четырех "цинковых пальцев" найдены в ДНК-связывающих доменах факторов регуляции транскрипции .

Механизм взаимодействия факторов регуляции транскрипции с ДНК-зависимыми РНК-полимеразами и промоторными участками генов остается одной из ключевых и все еще недостаточно изученных проблем функционирования генома клеток. Особенно скудна информация, касающаяся растительных объектов.

Мутации в генах, кодирующих факторы регуляции транскрипции у животных, могут привести к определенным заболеваниям .

У растений описаны представители семейства генов, кодирующих факторы регуляции транскрипции с лейциновыми "застежками-молниями". Было показано, что транскрипционные факторы этого типа отвечают за салицилатиндуцированное образование защитных антипатогенных белков и что мутации в указанных генах приводят к потере способности синтезировать эти белки

ПРОМОТОРЫ ГЕНОВ БЕЛКОВ СИГНАЛЬНЫХ СИСТЕМ И ЗАЩИТНЫХ БЕЛКОВ

В настоящее время интенсивно исследуется структура промоторных участков генов, отвечающих за приобретение иммунитета к различным патогенам. Уже давно привлекает внимание факт практически одновременного синтеза целого ряда патогениндуцируемых белков: Это может быть вызвано как дивергенцией сигнальных путей в одной сигнальной системе, что обусловливает активацию нескольких типов факторов регуляции транскрипции, так и "включением" тем или иным элиситором нескольких сигнальных систем, которые, функционируя параллельно, активируют несколько типов факторов регуляции транскрипции и, вследствие этого, вызывают экспрессию нескольких видов защитных белков. Не исключена также возможность того, что промоторы генов нескольких индивидуальных белков имеют одну и ту же структуру регуляторных элементов, что приводит к их одновременной экспрессии даже в случае сигнальной активации одного представителя факторов регуляции транскрипции.1

Последний вариант имеет место при действии на растения стрессового фитогормона этилена, когда фактор регуляции транскрипции взаимодействует с GCC-боксом промоторных участков нескольких этилениндуцируемых генов, что обеспечивает более или менее одновременное образование целой группы этилениндуцируемых белков . Такой принцип пакетного синтеза защитных белков реализуется при ответе клеток на различные стрессоры или элиситоры (к вторичным элиситорам можно отнести и стрессовые фитогормоны). Например, при действии повышенных температур индуцируется транскрипция группы генов, содержащих в промоторных участках общий регуля-

торный элемент HSE (heat shock element), отсутствующий у других генов . Эта закономерность была подтверждена с помощью приема создания гибридных генов с промотором гена теплового шока, состыкованного с другим геном, обычно не изменяющим интенсивности экспрессии при действии повышенных температур. В случае же трансгенных растений начиналась его экспрессия. В эукариотических клетках обнаружены также промоторные участки со сходными последовательностями нуклеотидов у различных генов, индуцируемых одним и тем же интермедиатом (вторичным посредником) сигнальных систем, например циклическим АМФ. В последнем случае сигнальная последовательность нуклеотидов промоторного участка имеет обозначение CRE (cyclic AMP response element).

У арабидопсиса обнаружена глюкокортикоидная система активации факторов регуляции транскрипции, включение которой приводило к экспрессии патогениндуцируемых защитных генов [Н. Kang et al., 1999]. Распространенными последовательностями нуклеотидов в G-боксе про-

моторов были CCACGTGG, а в С-боксе - TGACGTCA .

Вирус табачной мозаики и салициловая кислота вызывали у растений табака индукцию двух генов факторов регуляции транскрипции класса WRKY, узнающих в промоторных участках защитных генов определенную последовательность нуклеотидов - TTGAC (W-box). Активация этих факторов регуляции транскрипции осуществлялась с помощью их фосфорилирования протеинкиназами . Все белки класса WRKY, в отличие от других классов транскрипционных факторов (таких, как bZIP и myb), имеют консервативный домен, содержащий гептамерный пеп-

тид WRKYGQK .

(Один из доменов фактора регуляции транскрипции, отвечающего за преобразование жасмонатного сигнала, активирует регуляторный участок промотора нескольких генов, кодирующих жасмонат- и элиситор-индуцируемые белки, в частности стриктозидин-синтазу . Оказалось, что активирующим действием обладает N-концевой кислый домен фактора регуляции транскрипции, а обогащенный остатками серина С-концевой домен -I ингибирующим.

Показано, что промотор гена фенилаланин-аммиак-лиа- зы (важнейшего стартового фермента разветвленного метаболического процесса синтеза соединений, играющих защитную роль, - салицилата, фенольных кислот, фенилпропаноидных фитоалексинов и лигнина) содержит по две копии обогащенных АС-повторами участков .

При изучении промотора гена другого фермента синтеia фитоалексинов - халконсинтазы, у культуры клеток бобов, табака и риса было обнаружено, что в активации промотора принимают участие G-бокс (CACGTG) в области от -74 до -69 пар нуклеотидов и Н-боксы (ССТАСС) в области от -61 до -56 и от -126 до -121 пар нуклеотидов .

В других опытах было выяснено, что при действи и элиситоров экспрессия гена халконсинтазы у растений гороха зависит от области промотора от -242 до -182 пар нуклеотидов, в которой два участка содержат идентичные AT последовательности -ТААААТАСТ-, причем одна из них, располагающаяся в области от -242 до -226, была необходима для проявления максимальной активности гена .

Промотор гена стриктозидин-синтазы, одного из ключевых элиситориндуцируемых ферментов синтеза терпеноидных фитоалексинов, имеет активируемую факторами регуляции транскрипции область от -339 до -145 пар нуклеотидов . G-бокс, расположенный вблизи -105 пары нуклеотидов, не влиял на активность промотора.

При исследовании активности гена |3-1,3-глюканазы у растений табака было обнаружено, что она зависит от области промотора от -250 до -217 пар нуклеотидов, содержащей последовательность -GGCGGC-, характерную для промоторов генов, кодирующих патогениндуцируемые щелоч-

ные белки .

Так называемый PR-бокс промоторных участков многих патогениндуцируемых белков содержит последовательность (5"-AGCCGCC-3"), с которой связываются соответствующие факторы регуляции транскрипции, что приводит к экспрессии генов этих белков, в частности эндохитиназ и Р-1,3-глюканаз у растений томатов .

Многие гены патогениндуцируемых белков содержат в промоторах так называемые ocs-элементы, с которыми взаимодействуют факторы регуляции транскрипции, имеющие в своей структуре лейциновые застежки -молнии. У растений арабидопсиса факторы регуляции транскрипции, ответственные за преобразование этиленового сигнала, связываются и с GCC-боксом и с ocs-элементами промоторов, что приводит к экспрессии целого ряда защитных белков .

Исследование трансгенных растений табака с промотором щелочной хитиназы и репортерным геном GUS позволило установить, что активируемая этиленовым сигналом область промотора находится между -503 и -358 парами нуклеотидов, где имеются две копии GCC-бокса (5"- TAAGAGCCGCC-3") , который характе-

рен для промоторов многих этилениндуцируемых белков. Дальнейший анализ показал, что ответственный за реакцию на этилен участок промотора с двумя копиями GCC-бо- кса расположен между -480 и -410 парами нуклеотидов.

При исследовании реакции растений табака на обработку этиленом и инфицирование вирусом мозаики было обнаружено, что активность промотора гена (3-1,3-глюканазы зависит от области, расположенной между -1452 и -1193 парами нуклеотидов, где имеются две копии гептануклеотида

5-AGCCGCC-3" . Найдены и допол-

нительные области, существенные для регуляции активности промотора.

Рассмотренные выше элиситоры, рецепторы элиситоров, G-белки, протеинкиназы, протеинфосфатазы, факторы регуляции транскрипции, соответствующие им промоторные участки генов принимают участие в функционировании целого ряда сигнальных систем клеток, от которых зависит их реакция на сигналы различной природы и интенсивности: аденилатциклазной, МАР-киназной, фосфатидатной, кальциевой, липоксигеназной, НАДФН-оксидазной, NOсинтазной и протонной.

АДЕНИЛАТЦИКЛАЗНАЯ СИГНАЛЬНАЯ СИСТЕМА

Эта сигнальная система получила свое название по впервые охарактеризованному Сазерлендом ферменту аденилатциклазе, катализирующей образование основного сигнального интермедиата этой системы - циклического аденозинмонофосфата (цАМФ). Схема аденилатциклазной системы такова: внешний химический сигнал, например гормон или элиситор, взаимодействует с белкомрецептором плазмалеммы, что приводит к активации G- белка (связывания им ГТФ) и передаче сигнального импульса на фермент аденилатциклазу (АЦ), который катализирует синтез цАМФ из АТФ (рис. 6).

В аденилатциклазной системе различают Gs-белки, стимулирующие аденилатциклазу, и (5,-белки, тормозящие активность фермента. Различия между этими двумя видами белков определяются в основном особенностями ос-субъ- единиц, а не (3- и у-субъединиц. Молекулярные массы ocs - субъединиц G-белка равны 41-46 кДа, аг субъединиц - 40-41 кДа, (3,- и Р2 -субъединиц - 36-35 кДа, у-субъединиц -8- 10 кДа. Связывание G-белками ГТФ и его гидролиз до ГДФ и неорганического ортофосфата обеспечивают обратимость процессов активации аденилатциклазы .

Аденилатциклаза является мономерным интегральным белком плазматической мембраны и поэтому с трудом поддается экстракции и переходу в растворимую форму. Молекулярная масса аденилатциклазы клеток животных равна 120-155 кДа; имеются также растворимые формы аденилатциклазы 50-70 кДа, не чувствительные к кальмодулину и G-белкам . У растений молекулярная масса аденилатциклазы составляет 84 кДа. Кривая зависимости активности аденилатциклазы от рН имела одновершинный характер, причем пик активности для этого фер-

мента находился в области рН 4,8-5,2 .

Получены данные об изоформе аденилатциклазы с оптиму-

мом рН, равным 8,8 .

Аденилатциклаза может модифицироваться с внешней стороны мембраны гликозилированием, а с внутренней - фосфорилированием А-киназой [Северин, 1991]. Активность мембранной аденилатциклазы зависит от фосфолипидного окружения - соотношения фосфатидилхолина, фо- сфатидил-этаноламина, сфингомиелина, фосфатидилс"ери-

на и фосфатидилинозитола.

Элиситориндуцируемое повышение содержания цАМФ в клетках имеет преходящий характер, что объясняется активацией ФДЭ и, возможно, связыванием цАМФ-зависимы- ми протеинкиназами. Действительно, повышение концентрации цАМФ в клетках активирует различные цАМФ-зави- симые протеинкиназы, которые могут фосфорилировать различные белки, в том числе факторы регуляции транс - крипции, что приводит к экспрессии различных генов и ответу клетки на внешнее воздействие.

Коэффициент умножения сигнала, достигаемый при его передаче в геном и экспрессии генов, составляет многие тысячи. Схема умножения сигнала при функционировании аденилатциклазной сигнальной системы часто используется в учебниках биохимии . Эта сигнальная система продолжает интенсивно исследоваться на различных объектах, пополняя представления об информационном поле клеток и его связи с внешними информационными потоками.

Необходимо заметить, что вопрос о функционировании аденилатциклазной сигнальной системы в растительных объектах на протяжении почти четверти век а продолжал оставаться дискуссионным, разделяя исследователей на ее

ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ

Рис. 6. Схема функционирования аденилатциклазной сигнальной

системы АЦ* - активная форма аденилатциклазы; ПКА и ПКА*- неактив-

ная и активная формы протеинкиназы А; ПЛплазмалемма; ФДЭ - фосфодиэстераза; ФРТ* - активная форма фактора регуляции транскрипции

сторонников [Доман, Феденко, 1976; Королев, Выскребенцева, 1978; Franco, 1983; Яворская, Калинин, 1984; Newton, Brown, 1986; Каримова, 1994, Assman, 1995; Trewavas, Malho, 1997; Trewavas, 1999; и др.] и противников . Первые опирались на данные о повышении активности аденилатциклазы и содержания цАМФ под действием фитогормонов и патогенов, об имитации экзогенным цАМФ действия различных фитогормонов, вторые - на факты, свидетельствовавшие о незначительном содержании цАМФ в растениях, об отсутствии в целом ряде опытов влияния фитогормонов на активность аденилатциклазы и т.д.

Успехи в области молекулярной генетики, сопоставление структуры генов белков-участников аденилатциклазной сигнальной системы у животных и растений склонили чашу весов в пользу сторонников ее функционирования у растений . Результа-

ты использования экзогенного цАМФ [Килев, Чекуров, 1977] или форсколина (активатора аденилатциклазы) свидетельствовали об участии цАМФ в сигналиндуцированнои цепи передачи сигнала. Применение теофиллина - ингибитора фосфодиэстеразы цАМФ, которая в растениях оказалась достаточно активной, показало, что приходная часть баланса цАМФ осуществляется достаточно интенсивно [Яворская, 1990; Каримова и др., 1990]. Были получены данные об изменении содержания цАМФ в растениях под влиянием патогенов , его необходимости для формирования ответа на действие патогенов [Зарубина и др., 1979; Очеретина и др., 1990].

Обращает на себя внимание факт АТФ-зависимого выделения во внеклеточную среду значительной части цАМФ, образованного в клетках животных , прокариот , водорослей и высших рас-

тений . По-

казательно, что у растений, так же как у животных, можно было снизить накопление цАМФ в клетках и выход его во внеклеточную среду с помощью простагландина , не обнаруживаемого в растениях. Возмож-

но, что эту роль выполняет аналогичный простагландину оксилипин - жасмонат. Предполагается возможность участия в выносе цАМФ из клетки специальных АТФ-связыва-

ющих белков .

Целесообразность секреции цАМФ из клеток растений в среду объясняют, в первую очередь, необходимостью достаточно быстрого снижения концентрации этого вторичного посредника для того, чтобы не происходило перевозбуждения клеток . Относительно быстрое снижение концентраций вторичных посредников после достижения максимального уровня является непременнной неспецифической чертой функционирования всех сигнальных систем.

Вероятно, выводимый за пределы плазмалеммы цАМФ принимает участие в регуляции внеклеточных процессов [Шиян, Лазарева, 1988]. Это мнение может основываться на обнаружении экто-цАМФ-зависимых протеинкиназ , использующих секрецию цАМФ из клеток для активирования фосфорилирования белков за пределами плазмалеммы. Полагают также, что цАМФ вне клетки может выполнять роль первого посредника [Федоров и др., 1990], индуцируя запуск каскада реакций сигнальных систем в соседних клетках, что было показано на примере многоклеточных слизевых грибов .

Привлекают внимание данные, полученные на животных объектах, об ингибировании экзогенным аденозином (который может рассматриваться в качестве продукта деградации цАМФ) кальциевых каналов клеток [Меерсон, 1986] и активировании - калиевых каналов [Орлов, Максимова, 1999].

Большой интерес вызывает информация о возможности регуляции секретируемым цАМФ развития патогенных грибов , в частности ржавчины ячменя , Magnaporthe grisea, поражающего растения риса , пыльной головни Ustilago maydis , Erysiphe graminis , Colletotrichum trifolii , пигментирования Ustilago hordei . В зависимости от концентрации цАМФ происходила стимуляция или подавление развития грибов. Полагают, что у них в трансдукции цАМФ-сигнала принимают участие гетеротримерные G-белки .

Накапливается все больше данных о влиянии различных сигнальных молекул на секрецию цАМФ растительными клетками. Было показано, что роль АБК в адаптации растений к стрессу может заключаться в ее способности регулировать содержание и выход цАМФ из клеток. Предполагается, что уменьшение содержания цАМФ при действии АБК вызвана АБК-индуцированным повышением содержания Са2+ в цитозоле и ингибированием аденилатциклазы. Известно, что Са2+ в высокой концентрации ингибирует активность аденилатциклазы у эукариот . В то же время Са2+ может уменьшить содержание цАМФ, индуцируя повышение активности фосфодиэстеразы, гидролизующей цАМФ. Действительно, активация фосфодиэстеразы цАМФ комплексом Са2+ -кальмодулин была обнаружена у растительных объектов [Феденко, 1983].

Показана зависимость профиля фосфорилированности полипептидов от экзогенного цАМФ. Число полипептидов, фосфорилирование которых стимулировалось цАМФ, было наибольшим при микромолярной концентрации цАМФ. Привлекает внимание факт сильного цАМФ-индуцирован- ного повышения фосфорилированности полипептида 10 кДа при низкой температуре (рис. 7) [Каримова, Жуков, 1991; Ягушева, 2000]. Интересно, что полипептид с такой молекулярной массой является белковым регулятором фосфодиэстеразы цАМФ, который активируется абсцизовой кислотой и Са2+ и снижает содержание цАМФ за счет его гидролиза фосфодиэстеразой.

Изучение особенностей активации цАМФ-зависимых протеинкиназ и фосфорилирования ими различных бел - ков - одно из важнейших направлений исследований аденилатциклазной сигнальной системы. цАМФ-зависимые протеинкиназы (ПКА) - это ферменты, активирующиеся при взаимодействии с цАМФ и катализирующие перенос концевого остатка фосфорной кислоты с АТФ на гидро - ксильные группы сериновых или треониновых остатков белков-акцепторов. Ковалентная модификация белков, осуществляемая при фосфорилировании, приводит к изменению их конформации и каталитической активности, вызывая ассоциацию или диссоциацию их субъединиц и т.д.

Молекулярная масса белков, кДа

Рис. 7. Влияние цАМФ на фосфорилирование белков трехдневных проростков гороха [Каримова, Жуков, 1991]

1 - контроль: срезанные побеги переносили на 2 ч черешками в воду, затем еще на 2 ч - в раствор меченного по 32 Р ортофосфата; 2 - срезанные растения переносили на 2 ч в раствор 1 мкМ цАМФ, затем еще на 2 ч - в раствор меченного по 32 Р ортофосфата

Субстратами в протеинкиназной реакции являются MgАТФ и фосфорилируемый белок. Белковые субстраты могут быть одновременно субстратами для цГМФ- и цАМФзависимых протеинкиназ по одним и тем же остаткам серина (треонина), но скорость цАМФ-зависимого фосфорилирования в 10-15 раз больше, чем у цГМФ-зависимых протеинкиназ . Субстраты цАМФ-зависимых протеинкиназ располагаются во всех частях клетки: цитозоле, эндоплазматическом ретикулуме (ЭПР), аппарате Гольджи, секреторных гранулах, цитоскелете и ядре.

Из клеток растений были выделены протеинкиназы, активируемые экзогенным цАМФ, например, из колеоптилей кукурузы - протеинкиназа 36 кДа . Като и соавт. выделили из ряски Lemna paucicostata три типа протеинкиназ: 165, 85 и 145 кДа, одна из которых ингибировалась цАМФ, другая активировалась цАМФ и третья была цАМФ-независимой.

Второй тип протеинкиназ фосфорилировал полипептиды

59, 19, 16 и 14 кДа.

Экзогенный цАМФ вызывал изменения (в основном, ингибирование) фосфорилирования ряда полипептидов хлоропластов, опосредованного участием протеинкиназ

Один из первых генов протеинкиназы, клонированных в растениях, был похож на семейство протеинкиназ А животных по последовательностям нуклеотидов . Имеются примеры сходства аминокислотных последовательностей протеинкиназ А из растений (их гомологию) с протеинкиназами А животных. Несколько групп исследователей сообщили о клонировании генов, гомологичных гену протеинкиназы А (обзорные работы: ). Протеинкиназа из петунии фосфорилировала специфичный синтетический субстрат протеинкиназы А . Сообщалось о том, что добавление цАМФ к экстрактам растений стимулирует фосфорилирование специфичных белков . Исследование мест фосфорилирования в фенилаланин-аммиак-лиазе (ФАЛ) - ключевом ферменте биосинтеза фитоалексинов, обнаружило сайты, специфичные для протеинкиназы A .

Использование высокоспецифичного белкового ингибитора (БИ) цАМФ-зависимых протеинкиназ позволило подтвердить предположение , что цАМФ-зависимые протеинкиназы могут быть активированы эндогенным цАМФ еще в процессе приготовления образца: БИ подавлял базальную протеинкиназную активность экстрактов из листьев в разных опытах на 30-50% [Каримова, 1994]. Интермедиаты липоксигеназной сигнальной системы ГДК и МеЖК активировали в присутствии цАМФ протеинкиназную активность на 33- ^8% [Каримова и др., 19996]. Салициловая кислота индуцировала повышение уровня цАМФ-зависимой фосфорилированности полипептидов 74, 61 и 22 кДа в листьях гороха [Мухаметчина, 2000]. цАМФ-стимулируемая протеинкиназная активность растворимых белков листьев гороха зависела от концентрации Са2+ [Каримова и др., 1989; Тарчевская, 1990; Каримова, Жуков, 1991], причем ферментативная активность обнаруживалась также в изолированных клеточных стенках, ядрах, плазматических мембранах.

В растениях найдены гены, кодирующие фермент протеинфосфатазу, мишенью которой являются белки, фосфорилированные с помощью протеинкиназы А.

Для характеристики аденилатциклазной сигнальной системы чрезвычайно важен факт обнаружения в растениях генов, кодирующих белковые факторы регуляции транскрипции, которые имеют протяженные последовательности нуклеотидов, гомологичные CREBS - цАМФ-связываю- щему фактору транскрипции у животных .

Многочисленные данные о влиянии цАМФ на ионные каналы клеток растений и относительно слабая экспериментальная база представлений о возможности передачи сигналов от цАМФ через фосфорилирование белковых факторов регуляции транскрипции в геном, с одной стороны, укрепляют позиции сторонников существования непрямого (через активацию ионных каналов) сигнального аденилатциклазного пути и, с другой, заставляют усилить попытки получения доказательств функционирования прямого цАМФ-сигнального пути.

МАР-КИНАЗНАЯ СИГНАЛЬНАЯ СИСТЕМА

Митогенактивируемые серин-треонинового типа протеинкиназы (МАРК) и МАР-киназный сигнальный каскад (сигнал -> рецептор -> G-белки -> МАРККК -»

-> МАРКК -> МАРК -> ФРТ -> геном), достаточно полно изученные в животных объектах, функционируют и в клетках растений (рис. 8). Им посвящены обзорные статьи

И работы экспериментального характера, в которых сообщаются сведения об индивидуальных представителях этой сигнальной системы и особен-

ностях их регуляции.

МАР-киназный каскад "включается" при митозе (чем и объясняется название этих протеинкиназ), при обезвожива-

нии , гипоосмо-

тическом стрессе , низкой температуре , механическом раздражении растений

Повреждении тканей , окислительном стрессе , действии патогенов , элиситоров (в

том числе харпинов , криптогеина , олигосахаридов ), стрессовых фитогормонов жасмоната , сали-

цилата , системина , этилена ).

Зависимость функционирования МАР-киназного каскада от различных воздействий нашла отражение в названиях некоторых МАР-киназ, например WIPK и SIPK (соответст-

венно wound-induced protein kinases и salicylate-induced protein

Рис. 8. Схема функционирования МАР-киназной сигнальной системы

ККМАРК - киназа киназы МАР-киназы; КМАРК - киназа МАРкиназы; МАРК - митогенактивируемая протеинкиназа. Остальные обозначения - см. рис. 6

Чтобы сузить результаты поисковой выдачи, можно уточнить запрос, указав поля, по которым производить поиск. Список полей представлен выше. Например:

Можно искать по нескольким полям одновременно:

Логически операторы

По умолчанию используется оператор AND .
Оператор AND означает, что документ должен соответствовать всем элементам в группе:

исследование разработка

Оператор OR означает, что документ должен соответствовать одному из значений в группе:

исследование OR разработка

Оператор NOT исключает документы, содержащие данный элемент:

исследование NOT разработка

Тип поиска

При написании запроса можно указывать способ, по которому фраза будет искаться. Поддерживается четыре метода: поиск с учетом морфологии, без морфологии, поиск префикса, поиск фразы.
По-умолчанию, поиск производится с учетом морфологии.
Для поиска без морфологии, перед словами в фразе достаточно поставить знак "доллар":

$ исследование $ развития

Для поиска префикса нужно поставить звездочку после запроса:

исследование*

Для поиска фразы нужно заключить запрос в двойные кавычки:

" исследование и разработка"

Поиск по синонимам

Для включения в результаты поиска синонимов слова нужно поставить решётку "# " перед словом или перед выражением в скобках.
В применении к одному слову для него будет найдено до трёх синонимов.
В применении к выражению в скобках к каждому слову будет добавлен синоним, если он был найден.
Не сочетается с поиском без морфологии, поиском по префиксу или поиском по фразе.

# исследование

Группировка

Для того, чтобы сгруппировать поисковые фразы нужно использовать скобки. Это позволяет управлять булевой логикой запроса.
Например, нужно составить запрос: найти документы у которых автор Иванов или Петров, и заглавие содержит слова исследование или разработка:

Приблизительный поиск слова

Для приблизительного поиска нужно поставить тильду "~ " в конце слова из фразы. Например:

бром~

При поиске будут найдены такие слова, как "бром", "ром", "пром" и т.д.
Можно дополнительно указать максимальное количество возможных правок: 0, 1 или 2. Например:

бром~1

По умолчанию допускается 2 правки.

Критерий близости

Для поиска по критерию близости, нужно поставить тильду "~ " в конце фразы. Например, для того, чтобы найти документы со словами исследование и разработка в пределах 2 слов, используйте следующий запрос:

" исследование разработка"~2

Релевантность выражений

Для изменения релевантности отдельных выражений в поиске используйте знак "^ " в конце выражения, после чего укажите уровень релевантности этого выражения по отношению к остальным.
Чем выше уровень, тем более релевантно данное выражение.
Например, в данном выражении слово "исследование" в четыре раза релевантнее слова "разработка":

исследование^4 разработка

По умолчанию, уровень равен 1. Допустимые значения - положительное вещественное число.

Поиск в интервале

Для указания интервала, в котором должно находиться значение какого-то поля, следует указать в скобках граничные значения, разделенные оператором TO .
Будет произведена лексикографическая сортировка.

Такой запрос вернёт результаты с автором, начиная от Иванова и заканчивая Петровым, но Иванов и Петров не будут включены в результат.
Для того, чтобы включить значение в интервал, используйте квадратные скобки. Для исключения значения используйте фигурные скобки.